Prestations en Culture, Tri et Tests Cellulaires

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COMMANDEZ UNE PRESTATION EN CULTURE, TRI ET TESTS CELLULAIRES

LIGNEES, CULTURES PRIMAIRES & IPS

Préparation d'hiPSC

  Préparation d'hiPSC    

Les lignées cellulaires souches pluripotentes (IPS or HIPSC) sont des lignées souches générées à partir de cellules adultes déjà différenciées, et qui peuvent se diviser indéfiniment. La création d'IPSC se fait en isolant des cellules donneuses, en les mettant en culture, et en effectuant une transduction de gènes "souches" en utilisant un système viral. Les IPSCs sont ensuite sélectionnées par différentes méthodes.

Génération de Lignées Cellulaires Stables

Génération de lignées cellulaires stables     La génération de lignées cellulaires est un ensemble de techniques qui permettent l'expression ou l'inhibition d'un gène d'intérêt à long terme dans une cellule eucaryote. Les cellules en culture sont transfectées par un ADN linéaire ou circulaire puis mises en culture à nouveau. Des cellules uniques sont ensuite isolées, séparées dans des puits différents, sélectionnées pour la présence de l'ADN transfecté (i.e. par des antibiotiques), et analysées pour l'expression de la séquence d'intérêt

Génération de Lignées Cellulaires Immortalisées

Génération de lignées cellulaires immortalisées     Cette prestation inclut la préparation de lignées immortalisées à partir de cellules purifiées, par exemple des cultures primaires. Pour cela, les cellules sont mises en culture, immortalisées, et gardées en culture pour vérification du taux d'immortalisation et envoyées.

Préparation de Culture Primaire

Préparation de culture primaire     Les cellules primaires sont isolées directement de tissus d'organismes vivants et peuvent être mises en culture in vitro. Ces cellules ont eu un nombre de divisions cellulaires limité, et ainsi sont typiquement utilisées comme modèles de l'état physiologique in vivo. Un grand nombre de cultures primaires sont disponibles, et les conditions de culture pour chaque type de lignée sont indiquées.

Lignées Cellulaires

Lignées cellulaires     Une lignée cellulaire immortalisée est une lignée qui a échappé à la senescence cellulaire et donc peut se diviser indéfiniment. Les cellules immortalisées sont utilisées en tant que modèles en recherche en biochimie et biologie cellulaire. Toutes les lignées proposées sont testées et les conditions de culture sont fournies.

Culture en Bioréacteur

Culture en bioréacteur     La culture de cellules en bioréacteur est un procédé biotechnologique dans lequel différents types de cellules (bactéries, levures, insectes, mammifères) sont cultivés dans des conditions permettant la croissance et/ou l'expression de produits cellulaires ciblés tels que des protéines. Différents volumes peuvent être collectés, et plusieurs formats de collection sélectionnés: surnageant, pâte cellulaire, culots, lysats.

Tests & Expériences en Culture Cellulaire

Migration et Invasion Cellulaire

Migration et invasion cellulaire     La migration cellulaire est un processus cellulaire complexe et important, impliqué dans la progression de maladies telles que certains cancers ou l'arthrite. Cela correspond à l'abilité des cellules à migrer, et dans le cas de l'invasion, à progresser dans d'autres tissus en dégradant la matrice extracellulaire. Il est possible de regarder la migration à travers la chémotaxie, l'haptotaxie, la transmigration, l'invasion en utilisant une chambre de Boyden, ou une sélection de test de 2D-gap closure.

Prolifération Cellulaire

Prolifération cellulaire     Le test de prolifération cellulaire mesure le nombre de cellules (en absolu ou en relatif) qui se divisent. Un moyen typique pour mesurer la prolifération est la mesure de la synthèse d'ADN en utilisant de la thymidine-3H ou du BrdU, de l'activité métabolique avec un test XTT ou MTT, ou la mesure de la concentration d'ATP.

Viabilité Cellulaire

Viabilité cellulairaire    

Le test de viabilité cellulaire mesure la capacité d'une population de cellules à maintenir ou à recouvrir une viabilité. Les mesures pour ce genre de test incluent les tests de MTT ou XTT, la mesure d'[ATP], des tests en cytométrie de flux, et les tests d'intégrité de la membrane plasmique.

Adhésion Cellulaire

Adhésion cellulaire     L'adhésion cellulaire est définie par la liaison d'une cellule à une autre surface, telle que la matrice extracellulaire (ECM) ou d'autres cellules. L'adhésion cellulaire est essentielle pour l'intégrité des cellules, leur croissance et la communication avec d'autres cellules. Le test d'adhésion va regarder l'adhésion des cellules en présence de protéines de l'ECM comme le collagène ou le fibrinogène.

Test d'Apoptose

Test d'apoptose     L'apoptose correspond à la destruction génétiquement controllée de cellules individuelles sans aboutir à une réponse inflammatoire. Les techniques pour mesurer l'apoptose dans une population de cellules sont: la mesure de l'activité de caspases, de la libération de cytochrome C, le marquage du noyau, l'utilisation de techniques de cytométries telles que le TUNEL, la mesure du potentiel transmembranaire de la mitochondrie et la détection de protéines marqueurs.

Test de Stress Oxydatif & Détection de ROS

Test de stress oxydatif et détection de ROS     Les tests de stress oxidatif et de détection de "reactive oxygen species" (ROS) permettent d'identifier des changements dans l'état oxydatif de cellules. Dans cette expérience, plusieurs approches peuvent être sélectionnées: mesure de ROS, test d'activité de catalase, péroxidation des lipides, potentiel de membrane redox et réduction de la glutathion.

Migration Cellulaire 3D

Migration cellulaire 3D     La migration cellulaire est un processus cellulaire complexe et important, impliqué dans la progression de maladies telles que certains cancers ou l'arthrite. L'étude de la migration cellulaire dans des environnements en 3D permettent de simuler la matrice extracellulaire. Dans cette prestation, les tests peuvent être effectué in vitro (gel de collagen ou autre) ou en tissus.

Analyse des Flux Calciques sur Cellules en Culture

Analyse des flux calciques sur cellules en culture    

La dérégulation des flux calciques est impliquée dans de nombreuses maladies. La réalisation d'une analyse de flux de calcium peut donner des informations sur la fonction et l'activité d'un composé, d'un extrait ou de tout type de molécules et traitements sur cellules en culture.

Test de Sécretion d'Insuline

Test de sécrétion d'insuline    

Le test cellulaire permet la mesure de différents paramètres comme le niveau de protéines par Western Blot, ou encore la sécrétion d'insuline d'îlot de Langerhans.

Développement de Culture Cellulaire 3D

Développement de culture cellulaire 3D    

La culture cellulaire en 3 dimensions (culture 3D) permet de recréer les conditions de micro-environnement rencontrées dans le corps. Le but de la culture en 3 dimensions est de fournir aux cellules un environnement leur permettant de former des structures appelés sphéroïdes dans lesquelles les cellules peuvent interagir entre elles. Il existe de nombreux supports différents pour la culture 3D dont les éponges (à base de polymères ou de protéines de la matrice extracellulaire), les gels (synthétiques ou naturels) ou encore des supports plastiques (inserts ou film avec une micro-structure).

Expérience en Culture Cellulaire de Mammifère

Expérience en culture cellulaire de mammifère    

Les expériences en culture cellulaire correspondent à un ensemble de techniques qui peut être façonnées selon vos besoins. Cela inclut la possibilité de transfecter des cellules choisies, d'ajouter des composés, des hormones, d'utiliser différentes conditions de culture (température, 02, C02, milieu), et de collecter différents formats de résultats à plusieurs moments: cellules, lysats, imagerie.

Mesure de l'Expression de Protéines en Conditions Radiomarquées

Mesure de l'expresiion de protéines en conditons radiomarquées    

Les tests d'expression en conditions radiomarquées permettent de précisément mesurer l'expression d'un gène en regardant les protéines radiomarquées exprimées. L'expression se fait en présence de méthionine S35, la mesure peut être faite sur l'ensemble des protéines exprimées ou sur une ou plusieurs protéines spécifiques, après immunoprécipitation.

Purification d'Organelles & de Composants Cellulaires

Purifications

Purification de mitochondries, purification de microsome, purification de noyaux, purification de peroxisome, purification de protéasome    

Nos experts proposent des prestations pour la purification de mitochondries, de réticulum endoplasmique, de noyaux, de protéasomes, de peroxisomes et de ribosomes. 

En fonction du composant cellulaire, la purification peut se faire par centrifugation, billes magnétiques, par fractionnement, centrifugations successives ou purification par affinité. 

Selon l'organelle, différents degrès de purification peuvent être obtenus (RE brute; fraction enrichie en RE rugueux, fragment de peroxisome brute enrichie, ...). 

 

Séparation par Gradient de Densité

Séparation par gradients    

La séparation en gradient de densité par centrifugation permet l'isolation de composants de mixtures complexes, tel qu'un extrait cellulaire. Dans cette expérience, les conditions de séparation peuvent être intégralement définies, dans un format à façon, afin de garantir l'enrichissement des fractions importantes pour un projet donné.

Tri Cellulaire

Tri Cellule Unique (Single Cell)

Tri cellule unique (Single cell)     Le tri de cellule unique par fluorescence permet de sélectionner et d'isoler plusieurs cellules isolées selon des critères de sélection. Le tri en cellule unique est la première étape avant d'utiliser de nouvelles techniques et technologies telles que le séquençage de cellule unique, la qPCR et PCR digitale, ou encore la sélection de clone après l'édition de gène par CRISPR/Cas9.

Tri Population de Cellules

Tri population de cellules     Le tri de cellules par fluorescence permet la discrimination sélective entre différentes populations de cellules: par exemple, entre des cellules ciblées (expression ou ajout de composant chimique) par un ou plusieurs marqueurs fluorescents, et des cellules non fluorescentes. Dans cette expérience, plusieurs critères de sélection peuvent être choisis: fluorescence, taille, complexité et statut. Les cellules triées peuvent être dans certains cas utilisées pour des utilisations futures, telles que la remise en culture.

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