Services en culture, tests et tri cellulaire

La culture cellulaire est un processus complexe par lequel les cellules, procaryotes ou eucaryotes, sont cultivées dans des conditions contrôlées, en général à l'extérieur de leur environnement naturel.

Il existe essentiellement 2 types de cultures cellulaires:

• La génération de cellules primaires qui consiste à isoler directement des cellules à partir de tissus d'organismes vivants. Ces cellules sont mises en culture in vitro et ont un nombre de divisions cellulaires limité.
• La génération de lignée cellulaire immortalisée, les lignées cellulaires ont échappé à la senescence cellulaire et peut donc se diviser indéfiniment, par repiquage successifs.

Les modèles cellulaires fonctionnels permettent de profiler des composés en regardant leur impact sur des cibles définies.

Les cellules immortalisées sont utilisées en tant que modèles de recherche en biochimie et biologie cellulaire. Les cultures primaires quant à elles, sont typiquement utilisées comme modèles de l'état physiologique in vivo. Il existe en effet différents tests possibles sur les cellules.

1. Génération de lignées cellulaires
2. Mesures et tests cellulaire in vitro
3. Purification d'organelles cellulaires
4. Tri cellulaire

Génération de lignées cellulaires

Vous avez la possibilité de générer des lignées cellulaires, il peut s’agir de lignées stables ou immortalisées, des cultures primaires ou même des lignées cellulaires souches pluripotentes (IPS or HIPSC). Les IPS sont des lignées souches générées à partir de cellules adultes déjà différenciées, et qui peuvent se diviser indéfiniment. La création d'HIPSC se fait en effectuant une transduction de gènes "souches" en utilisant un système viral.

Sur Labtoo vous avez la possibilité de commander des lignées cellulaires dont les conditions de culture seront définies et fournies.

Mesures et tests cellulaires in vitro

Différents tests sont possibles sur les cellules, nos Experts vous permettent de regarder la migration et l’invasion cellulaire à travers la chémotaxie, l'haptotaxie, la transmigration, en utilisant une chambre de Boyden ou une sélection de test de 2D-gap closure. L'étude de la migration cellulaire peut aussi se faire sur environnements en 3D permettant ainsi de simuler la matrice extracellulaire. Vous pouvez également réaliser des test de viabilité (tests de MTT ou XTT, la mesure d'[ATP]), de prolifération (mesure de la synthèse d'ADN (thymidine-3H ou BrdU), de l'activité métabolique (XTT ou MTT), …), d’adhésion, d’apoptose (mesure de l'activité de caspases, de la libération de cytochrome C, marquage du noyau, TUNEL,…).

Il est également possible de réaliser des tests de stress oxydatif (mesure de ROS, test d'activité de catalase, péroxidation des lipides, …).

Par ailleurs, d’autres tests plus spécifiques sont possibles comme la transfection de cellules, l'ajout de composés et d’hormones, l’utilisation de différentes conditions de culture (température, 02, C02, milieu) ou encore l’expression de protéine en conditions radiomarquées.

Les résultats des tests peuvent vous être envoyés à plusieurs moments et sous différents formats : cellules, lysats, imagerie.

Purification d’organelles cellulaires

Nos experts proposent des prestations pour la purification de mitochondries, de réticulum endoplasmique, de noyaux, de protéasomes, de peroxisomes et de ribosomes.

En fonction du composant cellulaire, la purification peut se faire par centrifugation, billes magnétiques, par fractionnement, centrifugations successives ou purification par affinité.

Selon l'organelle, différents degrés de purification peuvent être obtenus (RE brute, fraction enrichie en RE rugueux, fragment de peroxisome brute enrichie, ...).

Vous avez aussi la possibilité de réaliser une séparation par gradient de densité, les conditions de séparation peuvent être intégralement définies, dans un format à façon, afin de garantir l'enrichissement des fractions importantes pour un projet donné.

Tri cellulaire

Le tri cellulaire permet de sélectionner et d'isoler plusieurs cellules en fonction de critères de sélection. Le tri de cellules individuelles est la première étape avant d'utiliser de nouvelles techniques et technologies telles que le séquençage de cellules uniques, la qPCR et la PCR numérique. Les cellules triées peuvent être utilisées pour certaines utilisations, telles que la remise en culture.

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